詳細(xì)說明
產(chǎn)品介紹
胰蛋白酶消化液,含有胰蛋白酶(0.25%)、EDTA 和酚紅,不含有鈣、鎂離子。該產(chǎn)品 經(jīng)過嚴(yán)格的過濾除菌,適用于組織和單層細(xì)胞的分離。
操作步驟
1. 吸取培養(yǎng)基,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以除去殘余的血清。
2. 加入適量的胰蛋白酶消化液,略蓋過細(xì)胞即可。根據(jù)細(xì)胞的特性可以增加或減少胰酶用 量,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。(不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同)
3. 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的 變化呈白茫狀;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。
4. 此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于 后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
保存條件
-20℃保存,冰袋運(yùn)輸,至少 1 年有效;
注意事項(xiàng)
1. 應(yīng)根據(jù)不同組織和細(xì)胞的性質(zhì)確定最佳消化時(shí)間和胰蛋白酶的用量,消化時(shí)間不宜過 長(zhǎng),以免影響細(xì)胞的活力。
2. 解凍后宜分裝使用,避免反復(fù)凍融。