|
>
印度HiMedia 維生素B12測定用培養(yǎng)基
品牌:HiMedia
貨號:M036
規(guī)格:100G
用途:維生素B12的微生物法測定
應用
維生素B12測定用培養(yǎng)基推薦采用萊士曼氏乳酸桿菌(ATCC 7830)作為測定用菌,進行維生素B12的微生物法測定。
原理
乳酸桿菌生長需要特別的營養(yǎng),因而在非選擇性培養(yǎng)基上很難生長。維生素測定用培養(yǎng)基用于維生素的微生物法測定。該方法需要三種培養(yǎng)基:即維持培養(yǎng)基,用于保持菌種活力;接種培養(yǎng)基,用于測試菌液的制備;測定用培養(yǎng)基,用于待測維生素的定量。
維生素B12測定用培養(yǎng)基,不含維生素B12,但包含所有其他維生素和必要養(yǎng)分,用于萊士曼乳酸桿菌(ATCC 7830)的生長。萊士曼乳酸桿菌(ATCC7830)作為測定用菌,由Capp等人描述并被美國藥典和美國分析化學家協(xié)會(AOAC)所推薦。
用已知稀釋度的維生素B12標準品,可以制備標準曲線。
測試菌液的制備是將將活化后的菌株接種到乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基中,推薦在37°C 孵育24小時,再離心、清洗、重懸于10ml 生理鹽水中,再通過濁度分析或酸度分析,確定生長反應。用維生素B12的濃度及對應的吸光度制作標準曲線。用標準曲線可確定待測樣本中的維生素B12的濃度。
應非常小心地避免培養(yǎng)基和玻璃器具的污染。應使用潔凈的無去污劑的玻璃器具。少量的外源物質的污染可能導致錯誤的結果。
用于接種的測定菌應在專用的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。