ELISA檢測(cè)

定義

       ELISA 檢測(cè)全稱(chēng)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA) 指將可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上，進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量方法。優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。

原理

      ①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。② 使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi)，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：

1、固相的抗菌素原或抗抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；

2、酶標(biāo)記的抗原或抗抗體，稱(chēng)為"結(jié)合物"（conjugate）；

3、酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑來(lái)源和標(biāo)本情況以及檢測(cè)具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。

ELISA主要有以下幾種類(lèi)型：

1、雙抗抗體夾心法測(cè)抗原 2、雙抗原夾心法測(cè)抗體 3、間接法測(cè)抗抗體   4、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體   5、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原   6、捕獲包被法測(cè)抗體   7、ABS-ELISA法

注意事項(xiàng)

1、客戶收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。

2、對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?/p>

3、對(duì)因特殊原因需要周期收集的標(biāo)本，需將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃下保存，并避免反復(fù)凍融。

4、標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月，-70℃可保存6個(gè)月。

客戶提供

1、實(shí)驗(yàn)樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等，郵寄前請(qǐng)與我公司技術(shù)支持溝通確認(rèn)。

2、檢測(cè)試劑盒（或用我公司提供的檢測(cè)試劑盒）。

3、盡可能詳細(xì)的背景資料。

終產(chǎn)品

詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

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