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品牌: MultiSciences
目錄號: 70-APC03-100
應(yīng)用: Spectrophotometry
反應(yīng)性: NoData
標(biāo)記: NoData
<textarea class="action-lazyload hide">1.產(chǎn)品簡介
Caspase是近年來發(fā)現(xiàn)的一組存在于胞質(zhì)溶膠中的結(jié)構(gòu)上相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶,它們的一個重要共同點(diǎn)是活性位點(diǎn)都含有半胱氨酸,并特異地斷開天冬氨酸殘基后的肽鍵。Caspase一詞是從Cysteine aspartic acid specific protease 的縮寫衍生而來,就反映了這個特征,而這種高度的特異性,在蛋白酶中是很少見的。細(xì)胞中合成的caspase以無活性的酶原狀態(tài)存在,經(jīng)活化方能執(zhí)行其功能。Caspase 3是細(xì)胞凋亡過程中最主要的終末剪切酶,也是CTL細(xì)胞殺傷機(jī)制的重要組成部分。Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9,并可以直接特異性剪切許多caspase底物,包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。本產(chǎn)品基于Caspase 3催化底物Ac-DEVD-pNA產(chǎn)生黃色的pNA (p-nitroaniline),測定pNA在405 nm吸光度的原理,檢測Caspase 3的活性。試劑盒提供的pNA可作為定量Caspase 3活性的標(biāo)準(zhǔn)品。當(dāng)使用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100 μl的分光光度檢測杯檢測時,除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測20個樣品(20T)或100個樣品(100T)。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?即用型,無需購買其他產(chǎn)品;
?靈敏度高,特異性強(qiáng),結(jié)果穩(wěn)定;
?價格便宜,現(xiàn)貨供應(yīng)。
3.試劑盒組分
| 目錄號/規(guī)格 | APC03-20 | APC03-100 |
| 20 T | 100 T | |
| 細(xì)胞裂解液 | 5 ml | 25 ml |
| 檢測緩沖液 | 5 ml | 25 ml |
| 底物Ac-DEVD-pNA (2mM) | 200 μl | 200 μl × 5 |
| pNA (10mM) | 200 μl | 1 ml |
4.結(jié)果示例
1)pNA標(biāo)準(zhǔn)曲線
| μM | A405 | Average | Corrected | |
| 200 | 0.544 | 0.538 | 0.541 | 0.500 |
| 100 | 0.295 | 0.292 | 0.294 | 0.252 |
| 50 | 0.173 | 0.172 | 0.173 | 0.131 |
| 20 | 0.094 | 0.093 | 0.094 | 0.052 |
| 10 | 0.068 | 0.068 | 0.068 | 0.027 |
| 0 | 0.041 | 0.042 | 0.042 | 0.000 |

2)HL60細(xì)胞經(jīng)10 μM喜樹堿誘導(dǎo)4 h,檢測Caspase 3酶活性變化
| A405 | Average | Corrected | |||
| 空白對照組 | 0.046 | 0.045 | 0.043 | 0.045 | 0.000 |
| 實(shí)驗(yàn)對照組 | 0.124 | 0.129 | 0.132 | 0.128 | 0.083 |
| 實(shí)驗(yàn)組 | 0.390 | 0.386 | 0.394 | 0.390 | 0.345 |
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