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碧云天生產(chǎn)的蘇木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)綜合了多種經(jīng)典的蘇木素染色方法，例如Harris法、Mayer法等，簡(jiǎn)化了操作步驟，縮短了操作時(shí)間，并且染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑?？梢杂糜诮M織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。

蘇木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被稱作蘇木精染色，是最常用的組織和細(xì)胞的染色方法之一。無色的蘇木素(hematoxylin)氧化后形成有醌環(huán)結(jié)構(gòu)(quinoid ring)的氧化蘇木素(hematein or haematein)，從而可以和三價(jià)的鋁離子、鐵離子等形成有顏色的帶正電荷的復(fù)合物(如hematein-Al³⁺ complexes)。氧化蘇木素(也稱氧化蘇木精)和鋁離子等形成有色的復(fù)合物的過程也被稱為Dye Lake Formation。細(xì)胞核內(nèi)基因組DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，雙鏈上的磷酸基團(tuán)向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的氧化蘇木素復(fù)合物結(jié)合，從而形成細(xì)胞核染色。蘇木素染色液有多種不同的配制方法，不同的方法可以把細(xì)胞核染色成不同深淺的藍(lán)色或藍(lán)紫色。

本蘇木素染色液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)色，本產(chǎn)品用于石蠟切片染色的效果圖參考圖1。

圖1. 本產(chǎn)品用于小鼠睪丸石蠟切片的染色效果圖。右圖為左圖局部放大圖片。圖中可見非常清晰的細(xì)胞核著色。本圖僅作參考，不同的樣品不同的檢測(cè)條件，實(shí)際獲得的結(jié)果可能有所差別。Scale bar, 100μm。

本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行蘇木素復(fù)染。

本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。一個(gè)100ml包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品，一個(gè)500ml包裝的本染色液至少可以染色1000個(gè)樣品。

包裝清單：  
   

保存條件：  
   

室溫避光保存，至少一年有效。

注意事項(xiàng)：  
   

染色后的分化為選做步驟，但分化后細(xì)胞核著色更清晰。

染色液可以重復(fù)使用多次，認(rèn)為效果不佳時(shí)再更換新的染色液。

樣品數(shù)量較多時(shí)，可以使用碧云天生產(chǎn)的染色架和染色缸，便于操作。

第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：    
    1.需要用戶自己準(zhǔn)備的試劑    
a.固定液：碧云天的    免疫染色固定液(P0098)，或    4%多聚甲醛固定液(P0099)。    
b.分化液(碧云天的鹽酸乙醇分化液(    C0161、    C0163、    C0165)或5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；    
c.如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，和封片劑(如碧云天的    C0185 PVP封片液、    P0126 抗熒光淬滅封片液或中性樹膠等其它封片劑)，及80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇；    
d.70%乙醇。    
    2.樣品處理    
    a.對(duì)于石蠟切片：    
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。    
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。    
無水乙醇5分鐘。    
90%乙醇2分鐘。    
80%乙醇2分鐘    
70%乙醇2分鐘。    
蒸餾水2分鐘。    
    b.對(duì)于冰凍切片：    
固定液固定10分鐘以上。    
蒸餾水2分鐘。    
    c.對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：    
固定液固定10分鐘以上。    
蒸餾水洗滌2分鐘。    
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。    
    3.蘇木素染色    
對(duì)于上述處理好的樣品：    
a.蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。    
b.浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。    
c.蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。    
d.選做：根據(jù)不同分化液的分化時(shí)間，分化約2-30秒，自來水沖洗10分鐘。    
此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。 注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行蘇木素染色。    
    4.脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色    
    a.脫水、透明、封片：    
70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。    
換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。    
用中性樹膠或其它封片劑封片。    
顯微鏡下觀察，細(xì)胞核呈藍(lán)色。    
    b.進(jìn)行其它染色：    
如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在蘇木素染色液染色后：    
70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。    
PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。    
然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳，可能染料對(duì)抗體結(jié)合有影響，請(qǐng)單獨(dú)染色。    
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