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染色原理操作步驟染色結果注意事項 專題
中文名稱 | MASSON-FONTANA黑色素染色液 |
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中文同義詞 | MASSON-FONTANA黑色素染色液 |
英文名稱 | MASSON-FONTANA melanin staining solution |
英文同義詞 | |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關類別 | |
Mol文件 | Mol File |
結構式 |
染色原理
黑色素為內源性色素。 正常情況下, 存在于人體的毛發(fā)、皮膚、以及眼的虹膜 、睫狀體、脈絡膜等處。在病理情況下, 存在于成黑色素細胞以及腫瘤的黑色素細胞中 。 黑色素有一個顯著的物理性質, 即完全不溶解于大多數(shù)有機溶劑一一幾乎可以肯定是由于黑素體中已形成的黑色素可不蛋白質緊密結合。黑色素另一個物理性質是能夠被強氧化劑漂白,盡管這個過程是緩慢的。在病理情況下,這種色素也可出現(xiàn)在良性痣細胞瘤中和惡性黑色素瘤中。在常規(guī)HE染色中不呈黑色而是呈棕黃色或棕黑色。許多方法可用于識別黑色素和黑色素生成細胞,如還原方法, 如Masson-Fontana銀技術和Schmorl三價鐵-鐵氰化鉀還原實驗;酶方法(如多巴反應);熒 光方法;免疫組織化學。
Masson-Fontana氏黑色素染色法的基本原理是: 硝酸氨銀經黑色素的作用還原為黑色的金屬銀。染色后黑色素呈黑色,該法屬于常用的黑色素特殊染色法,效果較其他染色理想。 此種方法在臨床上具有重要的診斷意義 。
操作步驟
1、固定:10%中性福爾馬林是的固定液,應當避免使用鉻酸鹽和氧化汞等固定液。
2、切片:所有類型的切片都可以處理,數(shù)值切片可能需要做一些調整。
3、將實驗切片及對照切片入蒸餾水中。
4、入 Fontana 氨銀溶液,避光浸染 12~24h 或 56℃溫箱孵育 30~40min。
4、蒸餾水多次洗凈(5~6 次)。
5、入海波溶液處理切片 1~5min。
6、自來水處理 3~5min。
7、(可選)入中性紅染色液,輕輕復染 5min。
8、蒸餾水沖洗。
9、95%乙醇、無水乙醇脫水。
10、二甲苯透明、中性樹膠封固。
染色結果
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黑色素、嗜銀細胞顆粒
黑色
細胞核
紅色
注意事項
1、注意鏡下控制 Fontana氨銀溶液的染色時間,以黑色素顆粒呈現(xiàn)黑色為宜。如果染色時間過長,脂褐素、膽色素、橙色血質也會呈黑色,不易于黑色素區(qū)分。
2、與Fontana氨銀溶液接觸的器皿應嚴格清洗,否則可能不殘余污染物發(fā)生化學反應。
3、長期暴露在56°C下的切片,可能會產生細小的沉著物。
4、脆弱的物質可能要涂上一層火棉膠,避免切片從載玻片上翹起。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
用途
黑色素染色,顯示黑色素顆粒
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