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概述操作步驟操作注意事項 專題
中文名稱 | 網(wǎng)狀纖維染色液(改良GOMORI銀氨法) |
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中文同義詞 | 網(wǎng)狀纖維染色液(改良GOMORI銀氨法) |
英文名稱 | Reticulin stain Kit,modified Gomori |
英文同義詞 | Reticulin stain Kit,modified Gomori;Reticulin Staining Solution (Gomori Sliver Method) |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關類別 | |
Mol文件 | Mol File |
結構式 |
概述
網(wǎng)狀纖維(Reticularfiber)是網(wǎng)狀結締組織內的一種纖維,由網(wǎng)狀細胞所產(chǎn)生,直徑多在0.2~1.0μm,有韌性而沒有彈性。網(wǎng)狀纖維的染色方法很多,但染色原理基本一致,大都采用氨銀浸法。改良Gomori網(wǎng)狀纖維染色原理是利用氨銀液易被組織吸附與組織的蛋白質結合,經(jīng)甲醛還原成黑色或棕黑色的金屬銀,沉積于組織內及其表面。傳統(tǒng)方法中還原后先采用氯化金調色,再用硫代硫酸鈉溶液洗去組織上未還原的銀鹽,本改良法省略該步驟,使網(wǎng)狀纖維對比得更清晰。
網(wǎng)狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)主要經(jīng)過氧化、漂白、媒染、浸銀、還原步驟,與改良Gordon-Sweets法不同之處在于后者采用酸性氧化劑和核固紅復染液。冰凍切片、低溫切片和火棉膠切片均可用于網(wǎng)狀纖維染色,各種固定液均可采用,重金屬汞鹽或鋨鹽固定液偶爾會產(chǎn)生一些非特異性銀背景。網(wǎng)狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)常用于鑒別腫瘤的性質和來源、癌與肉瘤、淋巴肉瘤與網(wǎng)狀細胞肉瘤、血管內皮瘤與血管外皮瘤、骨尤文瘤與骨網(wǎng)狀細胞肉瘤、腦膜瘤與星形細胞瘤、惡性神經(jīng)鞘瘤及早期浸潤癌等。
操作步驟
1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚4μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、把切片平置在染色架上,滴加Gomori氧化劑,氧化5min。
4、稍水洗
5、入草酸溶液漂白1~2min。
6、流水沖洗2min,蒸餾水稍洗。
7、硫酸鐵銨溶液媒染5min。
8、稍水洗,蒸餾水稍洗。
9、滴加網(wǎng)狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)染色3min。
10、蒸餾水稍洗。
11、Gomori還原劑還原1min。
12、流水沖洗10min。
13、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
操作注意事項
網(wǎng)狀纖維染色中使用的氨銀液是一種絡合物, 對組織有較強的親和力, 與組織中的蛋白質結合, 再經(jīng)甲醛還原成為銀后沉積于網(wǎng)狀纖維內及其表面, 得以顯色。配制氨銀液時, 所用的10%硝酸銀水溶液不宜太多, 氨水必須新鮮, 逐滴加入濃氨水, 一邊滴加一邊搖勻震蕩, 以嚴格控制所滴加的濃氨水劑量。氨水若滴加過量, 會不同程度地降低氨銀液染色敏感性, 使網(wǎng)狀纖維染色過淺, 氨過量也易導致脫片, 以邊滴加邊搖動, 直至溶液只有少量微顆粒為佳。
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